紫外可見分光光度計是一種常用的分析儀器，由于使用范圍廣，頻率高，經(jīng)常出現(xiàn)故障。了解光度計的常見問題及處理方法，有助于及時解決問題，保證實驗的順利進(jìn)行。

　　

　　1、關(guān)于儀器的預(yù)熱

　　

　　一般分光光度計的操作說明中，要求儀器預(yù)熱時間在20分鐘左右；如果是帶微處理器的分光光度計，儀器開機(jī)后會自動進(jìn)入自檢(初始化)狀態(tài)，大概需要10分鐘。在分光光度計預(yù)熱的過程中，很多用戶或多或少都存在這樣的問題，比如只預(yù)熱電路系統(tǒng)(不調(diào)整波長，打開吸收池黑盒蓋預(yù)熱等)，或者認(rèn)為初始化過程是預(yù)熱等。

　　

　　對于具有微處理器自檢功能的分光光度計，在儀器自檢(初始化)開始后，在測量窗口上設(shè)置所需的波長值，在吸收池中安裝純化水并放在光路上。調(diào)整“0000A”后，將儀器預(yù)熱，當(dāng)儀器讀數(shù)沒有變化時，再進(jìn)行測量。

　　

　　對于紫外可見分光光度計，由于有兩個光源(鎢燈和氘燈)，為了延長燈的使用壽命，可以在通電自檢后關(guān)閉測量中不使用的光源燈。
 

　　

　　2、波長準(zhǔn)確度的檢查和校正

　　

　　日常使用分光光度計的時候有沒有經(jīng)常檢查波長準(zhǔn)確度？答案是否定的，日常測量中儀器靈敏度下降時，要檢查波長準(zhǔn)確度。簡單的檢查方法(粗略檢查)是:儀器開啟后，將波長調(diào)至580nm，在吸收池底座的光通道中插入一張白色卡片紙。如果能觀察到矩形黃點，則波長精度在正常范圍內(nèi)，否則應(yīng)進(jìn)行波長校正。

　　

　　當(dāng)儀器被長距離運(yùn)輸、機(jī)械振動或更換燈泡時，必須檢查并校正波長準(zhǔn)確度。粗略檢查同上，其校正方法有:干涉濾光片或鐠釹濾光片校正法，使用氘燈的特征發(fā)射線校正法。

　　

　　3、關(guān)于吸光度測量的重復(fù)性

　　

　　在紫外可見分光光度計的測定過程中，發(fā)現(xiàn)同一溶液在不同的時間有不同的測定結(jié)果，即重復(fù)性不好。原因是什么？排除測量誤差的因素，可能的原因有:

　　

　　（1）儀器預(yù)熱時間不足或預(yù)熱方法不正確，應(yīng)延長預(yù)熱時間或采用正確的預(yù)熱方法。

　　

　　（2）光電轉(zhuǎn)換器(如光電池)的光電轉(zhuǎn)換效率因長期使用而發(fā)生變化。此時標(biāo)準(zhǔn)溶液和待測溶液的吸光度也較低，在相對定量時對結(jié)果影響不大。但對于這類儀器，一般建議連續(xù)使用時間不要超過3小時。如果需要長時間使用，最好間歇使用30min分鐘。